感染研究脑脊液肝素结合蛋白和降钙素原

摘要:目的探讨脑脊液中肝素结合蛋白(HBP)和降钙素原(PCT)在细菌性颅内感染诊断中的应用价值。方法收集年3月至8医院住院的颅内感染患者64例，分为细菌性感染组(23例)、病毒性感染组(16例)、结核性感染组(14例)、隐球菌性感染组(11例)，同时选择33例脑脊液白细胞计数(WBC)＜10×/L的非颅内感染性疾病患者作为对照组。测定并统计分析患者脑脊液中WBC、总蛋白(TP)、葡萄糖(Glu)、HBP和PCT水平。结果细菌性感染组脑脊液HBP均高于病毒性感染组、隐球菌性感染组和对照组(P均＜0.05)，PCT均高于病毒性感染组、结核性感染组和对照组(P均＜0.05)。脑脊液HBP、WBC、TP和PCT水平诊断细菌性颅内感染的ＲOC曲线下面积分别为0.、0.、0.、0.;当cut-off值分别为24.2ng/mL、82.0×/L、.6mg/L、0.ng/mL时，敏感性分别为73.9%、73.9%、65.2%、43.5%，特异性分别为

87.8%、58.5%、70.7%、90.2%。结论脑脊液HBP是一种有价值的诊断细菌性颅内感染的指标，在鉴别细菌性颅内感染与病毒性颅内感染时价值更高;而脑脊液PCT诊断细菌性颅内感染的价值与脑脊液WBC等传统指标相比优势不明显。

关键词:肝素结合蛋白;降钙素原;脑脊液;细菌性颅内感染

中图分类号:Ｒ文献标志码:A

细菌性脑膜炎和脑炎是严重的感染性疾病，早期诊断和治疗是提高患者存活率和降低后遗症发生率的关键[1]。在疾病早期，细菌性感染与结核杆菌、病毒等其他病原体引起的颅内感染的症状和体征相似，传统的检验指标如脑脊液白细胞计数(WBC)、总蛋白(TP)、葡萄糖(Glu)、C反应蛋白(CRP)等，难以鉴别这几种颅内感染，而诊断细菌性颅内感染的金标准，即脑脊液细菌培养，耗时较长且阳性率不高[2]，以致临床医生难以在短时间内明确诊断感染情况。因此，有必要找到更有价值的诊断方法来快速诊断或排除细菌性颅内感染，指导临床治疗。

降钙素原(procalcitonin，PCT)和肝素结合蛋白(heparin-bindingprotein，HBP)是近年来被认为很有价值的诊断细菌性感染的指标，也可用于鉴别诊断细菌性颅内感染。Alkholi等[3]报道，细菌性颅内感染患者血清PCT水平明显高于病毒性颅内感染患者;Linder等[4]报道急性细菌性脑膜炎患者脑脊液HBP水平显著高于病毒性神经系统感染患者和神经型疏螺旋体症患者。本文旨在通过比较细菌性、病毒性、结核性和隐球菌性颅内感染患者的脑脊液HBP和PCT水平，探讨HBP和PCT对颅内感染的鉴别诊断价值。

1对象与方法

1.1研究对象年3月至8医院住院的颅内感染患者64例，分为细菌性感染组(23例，男11例，女12例)、病毒性感染组(16例，男10例，女6例)、结核性感染组(14例，男10例，女4例)、隐球菌性感染组(11例，男5例，女6例)，同时选择脑脊液WBC＜10×/L的非颅内感染疾病患者33例(男15例，女18例)作为对照组。上述5组研究对象中位年龄(年龄范围)分别为49(15～65)、42(14～65)、33(19～60)、48(36～63)、40(14～72)岁。对照组患者疾病包括精神分裂症、尿崩症、脊髓压迫症、脊髓炎后遗症等。其他脏器功能受损(如慢性肾病、呼吸衰竭、心脏衰竭等)、肿瘤、合并其他部位感染以及免疫功能异常(系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等)的患者不纳入本次研究。研究对象均知情同意，医院医学伦理学委员会批准。

1.2仪器与试剂C全自动生化仪及其配套Glu试剂(美国Abbott公司);cobasE电化学发光分析仪及其配套脑脊液/尿液蛋白测定试剂、PCT配套试剂(瑞士Roche公司);ELX酶标仪(美国BioTek公司);牛鲍氏计数盘;HBP试剂(EIA法，杭州中翰盛泰公司)。

1.3标本采集与处理患者脑脊液标本由临床医生采集后及时送检。2h内完成WBC、TP和Glu检测。将脑脊液离心(×g，离心5min)取上清液，于-80℃保存，以待检测HBP和PCT。

1.4指标检测按《临床检验操作规程》(第3版)用牛鲍氏计数盘手工计数脑脊液WBC;用C全自动生化仪分别以苄索氯铵法和己糖激酶法检测TP和Glu;用cobasE电化学发光分析仪及配套试剂检测PCT;用ELISA法检测HBP水平。

1.5统计学分析用SPSS18.0统计软件进行。经正态性检验，非正态分布数据用中位数(第25百分位数，第75百分位数)[M(P25，P75)]描述，多组间比较用Kruskal-WallisH检验，组间两两比较用Nemenyi检验;绘制ROC曲线以评价检测指标的诊断价值。P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1脑脊液各指标检测结果见表1。

经Kruskal-WallisH检验，5组间HBP、WBC、Glu、TP和PCT水平差异均有统计学意义(P均＜0.05)。进一步经Nemenyi检验，细菌感染组WBC、Glu与病毒感染组、结核感染组和隐球菌感染组差异均无统计学意义(P均＞0.05);而HBP与结核感染组差异不明显(P＞0.05)，但高于病毒感染组(P＜0.01)和隐球菌感染组(P＜0.05);TP高于病毒感染组(P＜0.05)而与结核感染组和隐球菌组差异无统计学意义(P均＞0.05);PCT高于病毒感染组和结核感染组(P均＜0.05)，而与隐球菌感染组差异无统计学意义(P＞0.05)，除病毒感染组HBP、TP、Glu和PCT与对照组差异无统计学意义(P均＞0.05)以及结核感染组、隐球菌感染组PCT与对照组差异无统计学意义(P均＞0.05)外，其他与对照组差异均有统计学意义(P均＜0.01)。

2.25种指标诊断细菌性颅内感染的ROC曲线以其他感染组和对照组为对照，绘制脑脊液HBP、WBC、TP、PCT和Glu诊断细菌性颅内感染的ROC曲线，HBP、WBC、TP、PCT和Glu曲线下面积(AUC)分别为0.、0.、0.、0.和0.，见图1。Glu的AUC＜0.5，诊断效能弱不予计算。采用单一变量的Z检验比较各指标AUC，结果见表2。HBP的AUC大于TP、WBC和PCT，差异均有统计学意义(P均＜0.05);PCT与TP、WBC的AUC差异均无统计学意义(P均＞0.05)。

2.34种指标的诊断效能评价结果根据尤登指数为最大值的原则确定4种指标最佳cut-off值，HBP、WBC、TP、PCT分别为24.2ng/mL、82.0×/L、.6mg/L、0.ng/mL。各指标cut-off值所对应的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值见表3。

3讨论

本研究结果显示感染组与对照组脑脊液WBC、TP和Glu水平差异较明显，但在细菌性感染组与其他类型感染组间差异不明显，说明这些传统指标在判断是否存在颅内感染时是有效的，但在鉴别细菌性颅内感染和其他类型感染时效能不足，与文献报道[5]一致。

HBP也被称为azurocidin或CAP37，年由Shafer等首次分离和鉴定，它主要存在于中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒中[6]。当细菌感染时，菌体组织或其释放的毒素可刺激中性粒细胞释放HBP[6-10]，导致血液及体液中HBP水平升高。研究表明，检测血液及体液中HBP水平在诊断细菌性感染、监测感染的严重程度和预后中有重要价值[11-13]。Linder等[4]报道，脑脊液HBP诊断细菌性颅内感染的AUC达0.，当cut-off值为20ng/mL时，其诊断细菌性颅内感染的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为%、99.2%、96.2%和%。本研究结果显示脑脊液HBP在诊断细菌性颅内感染时的AUC为0.，诊断效能优于脑脊液WBC、TP及Glu等其他传统指标;当最佳cut-off值为24.2ng/mL时，其敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为73.9%、87.8%、85.8%、77.1%。本研究结果与Linder等[4]报道的结果有所差异，可能原因是:本研究样本数偏少，研究对象在进入我院前已有部分接受过治疗、脑脊液标本采集时间不一致以及研究对象的病情严重程度未分级等。

本研究结果还显示，细菌性感染组脑脊液HBP水平高于病毒感染组和隐球菌性感染组(P均＜0.05)。另外，5例脑脊液细菌培养阳性患者脑脊液HBP结果均大于41.7ng/mL，说明HBP在细菌性感染时会显著升高。脑脊液HBP在诊断细菌性颅内感染的AUC明显高于脑脊液TP、WBC和Glu，其敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值均优于脑脊液TP、WBC和Glu。说明脑脊液HBP是一种更具潜力的诊断细菌性颅内感染的指标，尤其可用于细菌性颅内感染与病毒性颅内感染的诊断及鉴别诊断。需要注意的是，细菌性感染组与结核感染组的脑脊液HBP差异无统计学意义，提示需结合其他指标来鉴别这两种感染。

PCT正常情况下由甲状腺C细胞分泌，当全身炎症反应时机体组织细胞(肝、肺、肾、脂肪以及肌肉等)可能是PCT的主要来源[14]。大量研究证实，PCT是细菌性脓毒症诊断以及鉴别诊断的重要指标之一[15-16]。本研究结果显示细菌性感染组脑脊液PCT水平高于病毒性感染组、结核性感染组和对照组(P＜0.05)，而与隐球菌感染组无差异(P＞0.05)。ROC曲线显示脑脊液PCT在诊断细菌性颅内感染的AUC为0.，当脑脊液PCT的cut-off值为0.ng/mL时，其敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为43.5%、90.2%、81.7%、61.5%。其诊断价值差于脑脊液WBC和TP，与汪明明[17]和胡孝彬[18]的结论相似。可能原因是脑组织在炎症刺激下产生PCT的能力有限;同时由于血脑屏障的存在，脑组织以外的组织和器官产生的PCT难以进入脑脊液。而周振军等[19]和陈友明等[20]认为脑脊液PCT在颅脑手术后的颅内感染的诊断具有重要价值，与本研究结果相悖，考虑其原因可能是开放性颅脑手术后的脑组织损伤、应激反应、出血以及血脑屏障的改变等因素使得术后感染的脑脊液PCT明显升高所致。

综上所述，脑脊液HBP水平在鉴别诊断细菌性颅内感染与病毒性、隐球菌性颅内感染时具有一定的价值，优于脑脊液WBC、TP和Glu等传统指标。而脑脊液PCT水平变化作为鉴别诊断细菌性颅内感染的价值与脑脊液WBC、TP等传统指标相比优势不明显，建议有更多的临床研究数据作进一步的判断。

4参考文献

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